人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白試劑盒
人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白試劑盒(Human Eosinophil Cationic Protein Kit,ECP Kit),是基于酶聯免疫吸附法(ELISA)原理研發的體外診斷/科研檢測試劑盒,可特異性檢測人血清、血漿、支氣管肺泡灌洗液及組織勻漿中人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(Eosinophil Cationic Protein,ECP)的含量,經特異性驗證、靈敏度測試及重復性實驗確認,無交叉反應,檢測結果準確可靠,無試劑降解、雜菌污染等問題。嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)是嗜酸性粒細胞活化后釋放的堿性蛋白,具有細胞毒性、抗炎及免疫調節作用,其異常表達與過敏性疾病、哮喘、過敏性鼻炎、寄生蟲感染及炎癥性疾病密切相關,是評估嗜酸性粒細胞活化程度、相關疾病輔助診斷、病情監測及抗炎藥物篩選的重要指標。本試劑盒核心特征是特異性強、操作便捷、檢測快速,可精準定量樣本中ECP含量,廣泛應用于臨床檢驗、呼吸內科科研、抗過敏/抗炎藥物篩選、過敏性疾病機制研究等領域,是臨床、科研領域的核心炎癥相關檢測工具。
檢測原理
本試劑盒的核心檢測原理,基于酶聯免疫吸附法(ELISA),聚焦人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)的抗原抗體特異性結合特性,結合炎癥相關指標檢測的精準需求設計:試劑盒預先將ECP特異性抗體包被于酶標板上,加入待檢測樣本(血清、血漿等)后,樣本中的ECP會與酶標板上的抗體特異性結合,形成抗原-抗體復合物;洗滌去除未結合的雜蛋白、嗜酸性粒細胞碎片、其他炎癥因子及無關蛋白后,加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的ECP二抗,與復合物特異性結合,形成“包被抗體-ECP-酶標二抗"的三明治結構;再加入底物液(TMB),HRP催化底物發生顯色反應,顯色強度與樣本中ECP的含量呈正相關,通過酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),對照標準曲線即可計算出樣本中ECP的具體含量。檢測流程規范:樣本采集后需及時處理(血清/血漿離心分離、支氣管肺泡灌洗液收集、組織勻漿破碎離心),按照試劑盒說明書稀釋樣本;酶標板平衡至室溫后,依次加入標準品、樣本及空白對照,37℃孵育30分鐘;洗滌3-5次后加入酶標二抗,37℃孵育20分鐘;再次洗滌后加入底物液,37℃避光孵育15分鐘;加入終止液終止反應,10分鐘內用酶標儀測定OD值,計算檢測結果。
產品特點
本產品針對人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)檢測需求優化制備,核心特點如下:
特異性強:采用高特異性ECP單克隆抗體,可特異性結合樣本中的ECP,不與嗜酸性粒細胞其他蛋白、炎癥因子及雜蛋白發生交叉反應,檢測特異性>99%,確保檢測結果精準,有效規避炎癥相關檢測中的干擾因素;
質控嚴格:每批次試劑盒均通過靈敏度、重復性、特異性及穩定性檢測,附完整QC報告,確保批內變異系數(CV)<8%、批間變異系數(CV)<10%,檢測靈敏度可達0.1ng/mL,符合臨床檢測與科研標準;
操作便捷:試劑盒含全套檢測試劑(包被酶標板、ECP標準品、酶標二抗、底物液、終止液、洗滌液等),無需額外配制核心試劑,步驟簡單,全程可在2.5小時內完成,適配常規實驗室操作,新手易上手;
樣本兼容廣:可適配人血清、血漿、支氣管肺泡灌洗液、組織勻漿四種核心樣本類型,樣本用量少(僅需50μL/孔),無需復雜預處理,僅需簡單離心、稀釋即可檢測,適配過敏性疾病、哮喘等相關科研與臨床多場景樣本;
適配場景廣:可用于哮喘、過敏性鼻炎、過敏性皮炎等過敏性疾病的輔助診斷與療效監測,寄生蟲感染、炎癥性腸病等炎癥性疾病的病情評估,嗜酸性粒細胞活化機制研究,抗過敏、抗炎藥物篩選,以及臨床檢驗、呼吸內科、免疫學科研實驗室的常規檢測。
適用樣本類型
本試劑盒適配人源樣本的體外檢測與科研實驗,適用樣本類型明確:人血清樣本(靜脈采血后離心分離,避免溶血,溶血會干擾檢測結果)、人血漿樣本(EDTA或肝素抗凝,離心分離)、人支氣管肺泡灌洗液樣本(無菌采集后離心,去除細胞雜質)、人組織勻漿樣本(肺組織、鼻黏膜組織、皮膚組織等破碎后離心取上清);實驗場景涵蓋哮喘、過敏性鼻炎、過敏性皮炎等過敏性疾病的輔助診斷與療效監測,寄生蟲感染、炎癥性腸病等炎癥性疾病的病情評估,嗜酸性粒細胞活化機制研究,抗過敏、抗炎藥物篩選與效果評估,以及相關實驗室的常規檢測。推薦檢測體系:使用試劑盒配套酶標板,酶標儀(波長450nm),按照說明書步驟操作;樣本稀釋比例為1:10(組織勻漿、支氣管肺泡灌洗液可根據濃度適當調整),標準品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL,參考區間為0.2~1.2ng/mL(具體以說明書為準)。(具體樣本處理方法請參考產品說明書)
儲存與注意事項
試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲存,嚴禁-20℃冷凍或常溫放置,避免溫度波動導致試劑降解、抗體活性喪失;
標準品、酶標二抗等試劑開封后,密封冷藏保存,1個月內用完,ECP標準品避免反復凍融,防止其蛋白結構破壞,底物液需避光保存;
樣本采集后及時處理,血清/血漿、支氣管肺泡灌洗液冷藏24小時內完成檢測,組織勻漿冷藏或-20℃短期保存,48小時內完成檢測,避免樣本變質、ECP降解;
操作時嚴格遵循無菌規范,佩戴防護用品,避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜;檢測過程中控制孵育溫度與時間,洗滌充分,避免未結合試劑殘留導致結果偏差;
底物液具有潛在刺激性,終止液為酸性溶液,操作時需謹慎,避免接觸衣物與皮膚,檢測完成后按生物安全規范處理廢棄試劑與酶標板;
支氣管肺泡灌洗液樣本需無菌采集,避免污染,采集后盡快離心處理,去除細胞雜質后再進行檢測。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產品說明書為準。