解說單克隆抗體時動物的選擇與免疫

（一）動物的選擇目前應用zui廣的是小白鼠和大白鼠，尤以小白鼠為好。就品系而言以Balb/c小白鼠應用zui廣，因為所有的小白鼠骨髓瘤系均從Balb/c小白鼠系誘導出來。Balb/c系小白鼠必須用純系的，雌雄均可，以8~12周齡為宜。大白鼠也可，能產生較多量的單抗體。現在已經在小鼠雜交瘤的基礎上，發展了小鼠－大鼠，小鼠－人以及人－人雜交瘤技術。（二）免疫一般而言，抗原的純度不很重要，特別是免疫原性較強的抗原。免疫程序、劑量和方法是關系到是否能得到所需要的單抗體的關鍵之一。正常...

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生化試劑分析及功能靈敏度

一、分析靈敏度1、檢測系統可檢測的樣本中zui低分析物濃度；2、檢測低限：定性含義；3、功能靈敏度：定量含義。二、檢測低限（LLD）1、定義：樣本單次檢測可以達到的非空白檢測響應量對應的分析物量。檢測系統或方法對小于或等于檢測低限的分析物量只能報告“無分析物檢出”。2、計算：通常估計95%和97.5%的兩種可能性①95%可能性：LLD=X（空白）+2×SD（空白）②99.7%可能性：LLD=X（空白）+3×SD（空白）三、功能靈敏度（FS）1、定義：以天間重復CV為20%時對...

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生化試劑空白吸光度及測試方法

一、試劑空白吸光度每種試劑都有一定的空白吸光度范圍，其改變往往提示該試劑的變質；原則上，吸光度上升的反應，其試劑空白吸光度越低越好，不能超過一個高限。反之亦然；試劑空白吸光度限值，常作為程序參數輸入儀器，如經核查超限，儀器會自動報警，提示更換試劑；舉例：利用Trinder反應為原理的檢測試劑會因含酚類物質被氧化為醌而變為紅色。二、試劑空白吸光度測試方法1、測定待檢試劑在測定波長、37℃±1℃條件下檢測蒸餾水的吸光度A；2、將試劑更換成蒸餾水，再測定吸光度B；3、...

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五種常用生化試劑品名

一、Tris（Hydroxymethyl）aminomethane三羥甲基氨基甲烷分子式:NH2C（CH2OH）3，分子量:121.14TRIS，是一種zui常用的生物緩沖液，常配成PH值為6.8，7.4，8.0，8.8。其PH值隨溫度變化很大。一般來說，溫度每升高一度，PH值下降0.03。二、EDTA：EthyleneDiamineTetraaceticAcid乙二胺四乙酸分子式:C10H16N2O8分子量:292.248EDTA是化學中一種良好的配合劑，它有六個配位原子，...

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化學試劑的分類及分級

化學試劑的種類很多，世界各國對化學試劑的分類和分級的標準不盡一致。IUPAC（InternationalUnionofPureandAppliedChemistry理論和應用化學聯合會（IUPAC）對化學標準物質的分類為：1、*：原子量標準。級zui接近的基準物質。2、B級：和*zui接近的基準物質。3、C級：含量為100＋－0.02%的標準試劑4、D級：含量為100＋－0.05%的標準試劑5、E級：以C級或D級為標準對比測定得到的純度的試劑化學試劑按用途可分為標準試劑，一般...

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飼養層細胞的培養

一、主要實驗材料1、培養液為F-DMEM。2、小鼠周齡為7～8w的性成熟母小鼠和周齡為8w的種公鼠。二、小鼠胚胎成纖維細胞（MEF）的培養1、小鼠胚胎的準備①性成熟母小鼠與種公鼠按1公（♂）:2母（♀）比例合籠。②每天早上觀察母小鼠陰道口。有乳白色或蛋黃色凍膠狀物（陰道栓）即確定為懷孕。④見栓當天上午定為懷孕的0.5d。③取懷孕12.5～14.5d母鼠,斷頸處死，無菌條件下暴露子宮。餿用鑷子提起近子宮頸端,分離子宮系膜,剪斷子宮角。⑤取出整個子宮,在無菌濾紙上吸干血跡,置于有...

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多克隆抗體的制備過程

1、免疫脾細胞的制備制備單克隆抗體的動物多采用純系Balb/c小鼠。免疫的方法取決于所用抗原的性質。一般血清的制備，也可采用脾內直接免疫法。2、骨髓瘤細胞的培養與篩選在融合前，骨髓瘤細胞應經過含8-AG的培養基篩選，防止細胞發生突變恢復HGPRT的活性（恢復HGPRT的活性的細胞不能在含8-AG的培養基中存活）。骨髓瘤細胞用10%小牛血清的培養液在細胞培養瓶中培養，融合前24h換液一次，使骨髓瘤細胞處于對數生長期。3、細胞融合的關鍵:①技術上的誤差常常導致融合的失敗。②融合試...

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抗體的四種定義

抗體monoclonalantibody；McAb1、定義1：能與相應抗原（表位）特異性結合的具有免疫功能的球蛋白。所屬學科：免疫學（一級學科）；免疫系統（二級學科）；免疫分子（三級學科）2、定義2：在人和動物體內，由于抗原或半抗原入侵刺激機體而在細胞中產生的免疫球蛋白。能可逆、非共價、特異地與相應抗原結合，形成抗原-抗體復合體。所屬學科：生物化學與分子生物學（一級學科）；總論（二級學科）3、定義3：機體內B細胞在抗原刺激下產生的具有特異性功能的球蛋白。所屬學科：水產學（一級...

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