2012-1121
一、優(yōu)點1、直接觀察活細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動。用于細胞學、遺傳學、免疫學、實驗醫(yī)學和腫瘤學等多種學科研究。2、直接觀察細胞的變化可便于攝影。3、研究細胞種類如低等到高等到人類、胚胎到成體、正常組織到腫瘤。4、便于使用各種技術(shù)：相差、熒光、電鏡、組化、同位素標記等方法觀察和研究細胞狀況。5、是分子生物學和基因工程學的研究對象，也是其主要的組成部分。6、易于施用物理、化學生物的實驗研究。7、易于提供大量生物性狀相似的實驗對象,耗資少比較經(jīng)濟。8、成為生物制品單克隆抗體生產(chǎn)和基因...
查看更多2012-1114
1、紫外消毒過程中會產(chǎn)生臭氧分子，對人體有害。一般情況下，消毒后至少半小時后再進入。2、所有的實驗器材都要經(jīng)過消毒處理；所有的細胞操作都在安全柜中進行，每一步都要注意不能用手碰到瓶口，培養(yǎng)液不能碰到瓶口，拿培養(yǎng)瓶時要使培養(yǎng)瓶的瓶口微微翹起。3、細胞消化時間不能太長，要讓細胞盡快脫離不舒服的環(huán)境；離心時離心機轉(zhuǎn)速不能太高，實驗前要設定好離心轉(zhuǎn)速和時間；重懸細胞時要保證細胞*混勻，在顯微鏡下觀察細胞是一個一個的。4、傳代培養(yǎng)時要注意無菌操作并防止細胞之間的交叉污染。所有操作要盡量...
查看更多2012-117
1、化凍將血清（FetalBovineSerum，Hyclone）從－20℃冰箱取出，放于4℃冰箱化凍過夜；也可室溫（或浸于自來水中）化凍，化凍后若不馬上滅活，可以放入4℃冰箱暫時保存；2、滅活①放入室溫的水浴鍋內(nèi)開始加熱（同時放入一個內(nèi)裝200ml自來水的血清瓶，插入一根溫度計，溫度監(jiān)控以此為準）；②當溫度計顯示56℃時，控制在此溫度30分鐘±3分鐘；若不小心使溫度上升超過56℃，則：若仍未超過60℃，且時間很短（比如：不超過5分鐘），則仍可使用；若超過60℃...
查看更多2012-112
1、凍存條件：建議采用40-50%FBS+8%-10%DMSO+該細胞株無血清培養(yǎng)基2、凍存方法：①梯度凍存：4℃——1h；-20℃——30min；-80℃——過夜②使用凍存盒：直接放入-80℃冰箱中過夜（有些細胞不適應此種方法）3、復蘇方法：①打開水浴，將培養(yǎng)基放入水浴中，待其穩(wěn)定至37℃；②細胞從液氮內(nèi)取出后，應快速將細胞放于37℃水浴中，輕輕振搖，使其溶化，（盡量避免溶化前凍存管脫離水浴）；③將溶化后將細胞凍存懸液離心，轉(zhuǎn)速1000rpm，3min,后棄去上清，使細胞重...
查看更多2012-1026
細胞生長要求嚴格的無毒無污染環(huán)境，因此必須注意培養(yǎng)室的清潔衛(wèi)生，保持操作空間的無菌條件。1、培養(yǎng)室應為獨立、封閉的空間。培養(yǎng)室及緩沖間都應保持整潔，不要隨意出入；2、保持超凈工作臺的無菌環(huán)境，每次使用前打開紫外燈照射消毒15—30分鐘；每次使用后將廢棄物清理干凈，各用具規(guī)放整齊，用70%酒精擦凈臺面，再打開紫外燈照射30分鐘以上；3、定期擦洗桌面、地板、清潔培養(yǎng)室，并用0.1%的新潔爾滅溶液消毒；定期打開培養(yǎng)室的大紫外燈，將整個房間進行照射消毒；4、每次打開培養(yǎng)箱前，或手伸入...
查看更多2012-1024
一、康寧Corning1、標準TC處理：培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿為大氣下等離子體處理，滾瓶和培養(yǎng)管為真空等離子體處理，處理的表面帶負電，增加氧原子含量。2、CellBIND處理：是指微波等離子處理，處理效果更好，更親水。二、BD1、BDFalcon處理：為真空等離子處理。2、BDPrimaria處理：為真空等離子體加入氧氣和氨氣混合氣體處理，使表面有含氧和含氮基團。三、Nunc：表面處理專家1、PolySorp：對疏水性分子具有高親和力。2、MediSorp：化學性介于Poly...
查看更多2012-1022
一、細胞系（CellLine）原代培養(yǎng)舞經(jīng)傳代成功即成細胞系,由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系（LineageofCells）所組成。二、細胞株（CellStrain）通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物稱為細胞株。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。如果不能繼續(xù)傳代或傳代數(shù)有限,稱為有限細胞株（finitecellstrain）;如果可以連續(xù)傳代,稱為連續(xù)細胞株（continuouscellstrain）。對于人類腫瘤細胞,在...
查看更多2012-1018
1、擴增：不同的干細胞，其擴增方法不同。如造血干細胞為懸浮培養(yǎng)，而腫瘤干細胞則為貼壁培養(yǎng)的細胞。2、消化：根據(jù)細胞耐受性的不同，有多種方法，如機械法，化學法，以及膠原酶、胰酶消化等不同方法。3、凍存：取處于對數(shù)期的干細胞,消化,并吹打為單細胞懸液,用2X培養(yǎng)基重懸細胞后，將等體積DMSO逐滴加入細胞懸液中，輕輕吹打混勻，重懸細胞于凍存管中，并置于凍存盒中，凍存盒放入-80℃冰箱。4、分化：鑒定干細胞的一項重要指標就是它的分化能力。一般分化采取加入細胞因子誘導、共培養(yǎng)、小分子刺...
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